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主题：【原创】俺该作啥实验 -- 关中农民
家园 上网找本类似的标书看看？ 要不问问穿越教授二胡教授，他们是大拿，呵呵。
家园 that is what I think too
家园 外行建议要么？ 首先搞清它是不是的确诱导了凋亡，因为这是你以后所有假设的根本基础。
1，跟最近两三年的高引用文章学一学，多弄几个流行的、独特的、互补的且你有条件做的凋亡检测方法。
2，复查化合物本身。如果不是你自己做的，就让做的人彻底说服你：该化合物从结构、纯度、稳定性及其重复制备的可靠性皆毋庸置疑。
3，如果化合物结构已经搞清楚，找几个长得象的和一点也不象的分子，最好是已知靶点之已批准药物，做对照实验。(其实于方法论并不严谨，但是说服评审人，估计差不多。)
- 复 外行建议要么？
家园 thanks that is what I plan to do. However, I am still not confident. I had some negative feedbacks before from similar research approach. The reviewers seems do not buy what I proposed.
The compound is design and synthsized in my lab. Apoptosis is very clear, I used several ways(western blot, ELISA, Flow). But what is the molecule targets of the compound still remain unclear. I am not an good cancer biologist. So experts' suggestion is highly appreciated.
Many thanks
- 复 thanks
家园 我感觉你提到的方法比较常规一点 如果你向NIH申请的话，按眼目下的行情，得有一两件其他任何人都做不了的事情，只有你能做而且做得很熟。
就验证凋亡的实验方法而言，我一下能想起来就有敲除转染，针对包括经典的凋亡信号途径中(都是外行意见哦)Bcl-2家族，Caspase家族，p53等等，选几个方便的、能做的。
不过我感觉评审人的总印象大概是你把目标定得太高，从某个诱导凋亡现象出发，要找到确切靶点和机制，提出的方法设计却很不足。要知道现在很多单位有高内涵筛选，经常有化合物引发新现象，大家最头痛的事情跟你的一样：怎么厘清细胞内机制？然后经常是以没有结局而结束。
(以上都是外行根据有限道听途说和贴主有限信息之胆大妄言。还请潜水专家们指点、包涵。)
家园 确实如你所言 俺的实验室是个小实验室，在三流院校，没有太多设备去做敲除转染之类的实验。能做蛋白表达改变已经不错了。厘清细胞内机制是个痛苦的事。再说俺是有机化学出身，设计这样的实验比较痛苦。
多谢1
家园 I did similar exp before I have your number.
家园 great I will call you tomorrow if it is OK with you.
Many thanks